免疫学实验室主要从分子、细胞、实验动物等多层面系统开展中药药效作用机制探索和天然活性分子快速筛选鉴定等研究工作,为中药调节人体免疫系统的微观机制阐释提供理论支持和技术支撑。实验室目前已建立“靶蛋白制备及其与中药分子相互作用分析实验体系”、“抗肿瘤药物药效评价实验体系”、“细胞基因导入及分析分选实验体系”及“基因差异检测及痕量基因分析实验体系”4个实验平台体系,实行开放式管理,面向全院及全社会中医药研究领域,提供高水平、标准化的实验研究平台和实验共享服务。
免疫学实验室重点仪器介绍
仪器名称 | 品牌 | 规格型号 | 主要功能 | 研究对象 | 主要检测指标 |
流式细胞仪 | BD | FACSAria | 对处于快速直线状态中的单个细胞或生物颗粒进行逐个、多参数、快速的定性、定量分析技术并可对特定目标群体进行分选。其技术优点:检测速度快,测量指标多,采集数据量大,分析全面,方法灵活. | 1.多种多样的细胞:各种动物细胞(如外周血,骨髓,细针穿刺,体腔灌洗液,实体组织,悬浮或贴壁培养的细胞)、植物细胞、浮游生物、微生物、酵母;2.人工合成微球;3.血清、血浆、培养上清、细胞裂解液中的可溶性蛋白(CBA技术)。 | 常见检测指标:1.细胞结构(细胞大小、细胞颗粒度、细胞表面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA含量、蛋白质含量。)2. 细胞功能(细胞表面/胞浆/核的特异性抗原、细胞活性、细胞内/外的细胞因子、激素结合位点、细胞受体、蛋白磷酸化、pH值、钙离子浓度、细胞膜电位、线粒体膜电位。)3.分选功能:可通过流式分析将特定的目标群体分选后进行培养研究、为PCR、FISH等分子技术提供纯度较高的特异性细胞群,减少研究中的干扰因素,获得更准确的实验结果。 |
多色流式细胞分析仪 | BD | A1 | 对处于快速直线状态中的单个细胞或生物颗粒进行逐个、多参数、快速的定性、定量分析。 | 1.多种多样的细胞:各种动物细胞(如外周血,骨髓,细针穿刺,体腔灌洗液,实体组织,悬浮或贴壁培养的细胞)、植物细胞、浮游生物、微生物、酵母;2.人工合成微球;3.血清、血浆、培养上清、细胞裂解液中的可溶性蛋白(CBA技术)。 | 常见检测指标:1.细胞结构(细胞大小、细胞颗粒度、细胞表面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA含量、蛋白质含量。)2. 细胞功能(细胞表面/胞浆/核的特异性抗原、细胞活性、细胞内/外的细胞因子、激素结合位点、细胞受体、蛋白磷酸化、pH值、钙离子浓度、细胞膜电位、线粒体膜电位。) |
表面等离子共振分子互作分析系统 | 瑞典通用 | Biacore T200 | 确认蛋白相互作用的结合特异性;对蛋白质相互作用进行亲和力、动力学的全面分析;蛋白质组学研究;筛选能和靶蛋白结合的活性蛋白分子;直接对临床标本、组织,细胞匀浆等复杂标本进行分析;新药研发;针对不同药靶筛选药物分子;多分子复合物的结构和组装顺序的分析检测瞬时结合作用配体垂。 | 蛋白质、DNA、RNA、多糖、肽类、寡核苷酸等生物大分子,以及与上述相互作用的所有化合物小分子 | 1、 亲和力和动力学数据: 可提供分子之间相互作用的亲和力检测,获取亲和常数(Kd),其范围可从10-14至10-3M;同时可获取从103到3×109 M-1S-1的结合速率常数(ka)以及从10-5到1S-1的解离速率常数(kd);2、结合特异性和选择性研究:通过在线参比通道设计能够实际呈现样品的非特异结合情况,并且实时自动的参比扣减设计,能够最大程度的扣除非特异结合对结果的影响;自有数据分析软件的拟合直观显示数据质量,有效避免用户仅凭主观判断得到错误结果;3、浓度定量分析:可开展基于标准曲线的相对浓度定量也可开展不依赖标准曲线的绝对浓度定量。通常小于5%;4、热力学分析:专用软件向导程序、内置缓冲液脱气装置以及精确的温度控制系统通过测定不同温度下动力学常数,利用范德霍夫方程即可计算出过渡态的热动力学参数,包括熵变(ΔS)、焓变(ΔH)、吉布斯自由能(ΔG)等数据。 |
微滴式数字PCR仪 | Bio-Rad | QX200 | 1、基因表达差异研究,microRNA、lncRNAs、等位基因的不平衡表达,单细胞基因表达分析;2、基因组学及表观遗传学的研究,适用于拷贝数变异(CNV)、稀有序列、甲基化水平分析;3、第三方医学检测,对外周血中肿瘤游离DNA进行检测,灵敏度可达 0.0001%,定量监测突变频率;检测母体外周血标记游离胎儿DNA/RNA,在基因水平对各种遗传疾病准确检测;4、病原微生物检测、环境监测、食品安全及转基因成分的检测、NGS 测序。 | 各类基因物质:microRNA、lncRNAs、等位基因、单细胞基因、肿瘤游离DNA、游离胎儿DNA/RNA | 1、基因的绝对定量:不依赖Cq值,直接给出靶序列的起始拷贝数浓度;2、肿瘤筛查:在miRNA 0.5ng/μl条件下可检出,约为1.4 copy/106 EV;3、病毒筛查:检测浓度范围是1.1-175.5 copy/μl。 |
荧光生物发光检测系统 | PerkinElmer | IVIS Lumina III | 运用于生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术检测细胞及活体动物内部的细胞活动、药物分布及基因型为。该系统在观测活体动物体内肿瘤的生长及转移方面具有优越的性能表现。 | 小型实验动物、细胞、药物、基因表达 | 1、高灵敏度生物发光二维成像;2. 高性能荧光二维成像;3、生物发光值及荧光值的精准计算。 |
酶联荧光斑点图像自动分析仪 | CTL | ImmunoSpot UV | 自动拍摄多色荧光和双色酶联免疫斑点(ELISPOT)图像并自动分析,单细胞水平检测细胞因子或抗体的分泌水平,分析计算分泌细胞因子的细胞或分泌抗体的B细胞的频率 | 酶联免疫斑点样品 | 1、数码拍摄相机(CCD):硬件分辨率1.3百万像素,图像分辨率1000万像素;2、ELISOPT检测:检测和分析双色ELISPOT,能检测HRP和ALP的底物多种颜色;3、高倍光学镜头,可读取384、96、48、24孔白板、透明板,膜板,也可对病毒斑、克隆斑、菌落等实验结果分析。 |
快速蛋白纯化系统 | GE | AKTA avant 25 | 快速分离纯化多种生物分子,如蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸、核苷酸疫苗、病毒及天然小分子(TCM)等 | 蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸等生物分子 | 进样,编程,分离,峰收集准确,简单迅速;多种层析柱和多样纯化方案;蛋白纯化量微克级至毫克级 |
高通量流式电转化系统 | Lonza | 4D | 基于细胞治疗应用的体外原代细胞修饰(例如基因编辑,CAR-T细胞生产);瞬转生产的潜在治疗蛋白或抗体,用于结构筛选;生产大量瞬转修饰的原代细胞,用于细胞基础分析 | 人T细胞、CHO悬浮细胞、HEK293悬浮细胞等工程细胞,以及各种实验室用途的原代细胞和细胞系 | 作为封闭电转系统,选择对应于细胞的软件包及程序,直接一步式制备 |
落地式超高速离心机 | Beckman | AVATI JXN-30 | 用于分离、沉淀 | 细胞、核酸、蛋白质等样品 | 最高转速可达30000 rpm |