超高速高分辨多光子荧光寿命成像显微镜

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  该系统为徕卡公司生产型号为STELLARIS 8的多光子显微成像设备,主要由显微镜主机、红外激光器、共聚焦扫描系统、工作站等构成。

  该设备可以对使用荧光蛋白与荧光染料标记的活体小动物、在体组织、离体组织、活体细胞、固定细胞以及组织切片等样品三维高分辨荧光成像观察研究,可进行共定位研究、活细胞、活体组织和在体组织静态和实时动态3D定量荧光检测、共聚焦图像分析、生物结构三维重构分析、基于荧光光漂白恢复(FRAP)、荧光能量共振转移(FRET)、笼锁—解笼锁、光活化和快速荧光寿命成像(fast FLIM-FRET)等技术的蛋白质功能研究

  该系统为搭载在正置显微镜基础上的多光子显微系统,由于多光子显微镜成像有着更深的穿透力和有效分辨率,所以可以在活体上观察亚细胞结构的变化,该技术已经成功的应用到线虫、果蝇、斑马鱼等低等动物以及小鼠、大鼠甚至猴等哺乳类动物的神经系统的成像上,包括神经元、神经胶质细胞及脑血管和脑内微循环系统的成像以及各种组织器官。

  系统特色:同时具备单光子成像、多光子成像、荧光寿命成像等功能,配备了共振式扫描模块实现高速扫描成像,采用光谱式外置检测器实现二次谐波成像、三次谐波成像以及光谱式多光子成像,通过Lightning技术实现样品超高分辨成像。

   应用范围

  常见检测指标:多色荧光成像、大图拼接成像、3D成像、荧光寿命成像、多光子深层成像等。

  1.   多色荧光成像

  通过不同激发光和检测范围的组合,实现样品不同光谱区间的荧光成像。

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  2.   大图拼接成像

  通过电动载物台控制样品移动,将多个视野连续成像还原样品整体结构。

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  3.   3D成像

  通过单光子的针孔或多光子的激发原理,确保只有样品焦平面信号到达检测器,从而实现对样品的逐层扫描,从而还原样品三维结构。

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  4.荧光寿命成像

  采用脉冲式激光器进行荧光激发,结合时间分辨率较高的高灵敏度检测器,通过统计光子到达时间,从而对样品荧光寿命进行分析,从时间维度拆分不同的荧光信号。

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  5.超高分辨成像

  采用高灵敏度检测器识别样品荧光信号,根据各项光学部件参数进行解析还原样品真实结构,获取突破衍射极限的超高分辨图像。

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  6.多光子深层成像

  通过红外激光器的穿透特性,实现对样品深层组织成像,并还原三维结构。

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