探究缺氧状况下细胞的发生、发展、结构与功能、病变机制、衰老死亡的特征是生物医学研究的重要领域。构建缺氧培养环境是研究确立细胞缺氧损伤模型实验的基础工作。在构建缺氧细胞培养基础上，进一步对活细胞开展长时程的形态学观察，并获得相应数据与图像支持，是细胞学实验中重要的实验单元。需要开展的实验研究包括如下：

　　1.细胞缺氧培养实验系统

　　氧气浓度降低到通常大气压下的1-%10%，可创造出细胞在体内生长的类似环境。当细胞从高氧环境转移到低氧环境时，会发生一系列的代谢变化，包括有利于细胞成长和生存的变化。低氧环境可用来模拟一些重要的细胞发育过程，比如干细胞分化和应激响应等。

　　1.1使用我室的Thermo3131三气培养箱、BioSpherix高低氧培养箱可精确模拟细胞生长所需要的低氧环境条件。需要制备的步骤包括：（1）将细胞悬液或细胞贴壁在培养皿或培养瓶中，放入低氧培养箱中，调好缺氧浓度和温控条件，监测溶氧含量。（2）根据实验要求设定低氧培养时间，结束后及时移除细胞悬液作进一步实验处理。使用过程中需要注意低氧条件的均匀性、气密性、安全性。 

　　1.2使用微流控活细胞实时培养分析芯片平台系统，可实现根据环境参数（包括低氧条件、培养基、活化剂、抑制剂、检测试剂以及温度）预编程动态输入，实现完全自动操作。通过软件控制系统可流体切换，流速可自行根据需求设定，并可在预设的时间点改变，并能采用多类型培养板设计多种细胞实验培养。

微流控活细胞实时培养分析芯片平台

　　2.实时、连续动态监测细胞活性实验

　　利用非侵入性无损伤活细胞阻抗方法开展细胞活力和功能研究，该方法具有无需标记、动态提供最优检测时间、数据实时可视化、完整细胞效应图谱、活细胞检测、高通量检测并具有独立模块、自动化数据分析的特点，获得细胞实时动态数据。使用我室的安捷伦RTCA实时无标记细胞分析仪可开展动态、实时细胞活性行为的检测。检测指标包括：（1）细胞行为表征（2）细胞毒理（3）细胞侵袭/迁移（4）细胞黏附（5）细胞杀伤（6）细胞屏障功能分析（7）细胞信号转导受体研究。

　　3. 实时、连续动态监测细胞功能可视化成像实验

　　利用活细胞成像技术开展实时、连续动态监测细胞活力和功能研究，应用全自动显微镜观察细胞明场与荧光成像情况，结合长时程、动态成像技术，观察明场与荧光成像下的实时动态图像，可生图片与视频文件。使用我室的安捷伦RTCA实时无标记细胞分析仪、默克微流控活细胞实时培养分析芯片平台均可实现此功能。检测指标：（1）细胞行为表征（2）细胞毒理（3）细胞侵袭/迁移（4）细胞黏附（5）细胞杀伤（6）细胞屏障功能分析（7）细胞信号转导受体研究等。 

RTCA实时、连续动态细胞成像技术